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Covolan, Andrea (2012) Clonaggio e purificazione delle 7 isoforme umane di 14-3-3, per un'analisi comparativa del loro ruolo nella malattia di Parkinson. [Magistrali biennali]

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Abstract

Le 14-3-3 sono una famiglia di proteine capaci di legare centinaia di interattori diversi e di svolgere numerose funzioni, molte delle quali probabilmente ancora sconosciute. Il fatto che queste proteine interagiscano con varie proteine associate al PD, come LRRK2, α-sinucleina e tirosin idrossilasi, lascia supporre che possano rappresentare un anello di congiunzione fra le varie cause di questa malattia neurodegenerativa. Indagini sul ruolo delle 14-3-3 nel PD sono complicate dal fatto che, nell’uomo, sono presenti 7 isoforme, le quali potrebbero avere funzioni differenti tessuto-specifiche. Lo scopo di questa tesi è quello di clonare, esprimere e purificare le 7 isoforme umane di 14-3-3 in modo da poter intraprendere un’analisi comparativa del loro ruolo fisiologico e/o patologico nel contesto del PD. In particolare, dopo aver clonato e messo a punto un protocollo di purificazione per tutte le isoforme, è stato effettuato un esperimento preliminare per identificare quali di esse siano coinvolte nel processo di fibrillazione dell’α-sinucleina in vitro. Inoltre è stato fatto un primo tentativo di coimmunoprecipitazione in vitro tra 14-3-3 e LRRK2 ricombinanti al fine di studiare l’interazione isoforma specifica. Prima di procedere con questo esperimento, è stato valutato il livello di fosforilazione delle due serine di LRRK2 necessarie per il legame con le 14-3-3 e il possibile coinvolgimento della PKA in questa interazione.

Tipologia del documento:Magistrali biennali
Parole chiave:Parkinson, 14-3-3, α-sinucleina, LRRK2
Settori scientifico-disciplinari del MIUR:Area 05 - Scienze biologiche > BIO/09 Fisiologia
Codice ID:43863
Relatore:Bubacco, Luigi
Data della tesi:2012
Biblioteca:Polo di Scienze > CIS "A. Vallisneri" - Biblioteca Biologico Medica
Tipo di fruizione per il documento:on-line per i full-text
Tesi sperimentale (Si) o compilativa (No)?:

Bibliografia

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Aitken, A. 2003, "Protein consensus sequence motifs", Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), vol. 211, pp. 465-485. Cerca con Google

Aitken, A. 2002, "Functional specificity in 14-3-3 isoform interactions through dimer formation and phosphorylation. Chromosome location of mammalian isoforms and variants", Plant Molecular Biology, vol. 50, no. 6, pp. 993-1010. Cerca con Google

Berg, D., Holzmann, C. & Riess, O. 2003, "14-3-3 proteins in the nervous system", Nature Reviews Neuroscience, vol. 4, no. 9, pp. 752-762. Cerca con Google

Drolet, R.E. 2011, "Leucine-Rich Repeat Kinase 2 (LRRK2) Cellular Biology: A Review of Recent Advances in Identifying Physiological Substrates and Cellular Functions", Journal of neurogenetics, vol. 25, no. 4, pp. 140-151. Cerca con Google

Dzamko, N., Inesta-Vaquera, F., Zhang, J., Xie, C. & Cai, H. 2012, "The IkappaB Kinase Family Phosphorylates the Parkinson’s Disease Kinase LRRK2 at Ser935 and Ser910 during Toll-Like Receptor Signaling", PLoS ONE, vol. 7, no. 6, pp. 1-15. Cerca con Google

Gardino, A.K. 2006, "Structural determinants of 14-3-3 binding specificities and regulation of subcellular localization of 14-3-3-ligand complexes: A comparison of the X-ray crystal structures of all human 14-3-3 isoforms", Seminars in cancer biology, vol. 16, no. 3, pp. 173-182. Cerca con Google

Giurleo, J.T. 2008, "beta-lactoglobulin assembles into amyloid through sequential aggregated intermediates", Journal of Molecular Biology, vol. 381, no. 5, pp. 1332-1348. Cerca con Google

Haavik, J. & Toska, K. 1998, Tyrosine hydroxylase and Parkinson's disease, Humana Press Inc. Cerca con Google

Iaccarino, C. 2007, "Apoptotic mechanisms in mutant LRRK2-mediated cell death", Human molecular genetics, vol. 16, no. 11, pp. 1319-1326. Cerca con Google

Inglis, K.J. 2009, "Polo-like Kinase 2 (PLK2) Phosphorylates alpha- Synuclein at Serine 129 in Central Nervous System", Journal of Biological Chemistry, vol. 284, no. 5, pp. 2598-2602. Cerca con Google

11 Johnson, C. 2010, "Bioinformatic and experimental survey of 14-3-3-binding sites", Biochemical Journal, vol. 427, no. 1, pp. 69-78. Cerca con Google

Kent, C.B. 2010, "14-3-3 Proteins Regulate Protein Kinase A Activity to Modulate Growth Cone Turning Responses", Journal Of Neuroscience, vol. 30, no. 42, pp. 14059-14067. Cerca con Google

Kleppe, R. 2011, "The 14-3-3 proteins in regulation of cellular metabolism", Seminars in cell & developmental biology, vol. 22, no. 7, pp. 713-719. Cerca con Google

Kurz, A. 2012, "A53T-alpha-synuclein-overexpression in the mouse nigrostriatal pathway leads to early increase of 14-3-3 epsilon and late increase of GFAP", Journal of neural transmission, vol. 119, no. 3, pp. 297- 312. Cerca con Google

Lashuel, H. 2002, "alpha-Synuclein, especially the Parkinson's disease-associated mutants, forms pore-like annular and tubular protofibrils", Neurobiology of aging, vol. 23, no. 1, pp. 409-S409. Cerca con Google

Li, X.T. 2011, "Phosphorylation-Dependent 14-3-3 Binding to LRRK2 Is Impaired by Common Mutations of Familial Parkinson's Disease", PLOS ONE, vol. 6, no. 3. Cerca con Google

Maroteaux, L., Campanelli, J.T. & Scheller, R.H. 1988, "Synuclein: A Neuron-Specific Protein Localized to the Nucleus and Presynaptic Nerve Terminal", The Journal of Neuroscience, vol. 8, pp. 2804- 2815. Cerca con Google

Megidish, T. 1998, "A novel sphingosine-dependent protein kinase (SDK1) specifically phosphorylates certain isoforms of 14-3-3 protein", Journal of Biological Chemistry, vol. 273, no. 34, pp. 21834-21845. Cerca con Google

Menegon, A., Bonanomi, D., Albertinazzi, C., Lotti, F., Ferrari, G., Kao, H.T., Benfenati, F., Baldelli, P. & Valtorta, F. 2006, "Protein kinase A-mediated synapsin I phosphorylation is a central modulator of Ca2+- dependent synaptic activity", The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience, vol. 26, no. 45, pp. 11670-11681. Cerca con Google

Merlini, G. & Bellotti, V. 2003, "Molecular Mechanisms of Amyloidosis", N Engl J Med, vol. 349, no. 6, pp. 583-596. Cerca con Google

Michael, R.R. & Dianna, J.B. 1999, "Fusicoccin, 14-3-3 Cerca con Google

Proteins, and Defense Responses in Tomato Plants", Plant Physiology, vol. 119, pp. 1243- 1250. Cerca con Google

Nichols, R.J., Dzamko, N., Morrice, N.A., Campbell, D.G., Deak, M., Ordureau, A., Macartney, T., Tong, Y., Shen, J., Prescott, A.R. & Alessi, D.R. 2010, "14-3-3 binding to LRRK2 is disrupted by multiple Parkinson's disease-associated mutations and regulates cytoplasmic localization", Biochemical Journal, vol. 430, pp. 393-404. Cerca con Google

Obsil, T. 2011, "Structural basis of 14-3-3 protein functions", Seminars in cell & developmental biology, vol. 22, no. 7, pp. 663-672. Cerca con Google

Ottmann, C., Marco, S., Jaspert, N., Marcon, C., Schauer, N., Weyand, M., Vandermeeren, C., Duby, G., Boutry, M., Wittinghofer, A., Rigaud, J. & Oecking, C. 2007, "Structure of a 14-3-3 Coordinated Hexamer of the Plant Plasma Membrane H+-ATPase by Combining X-Ray Crystallography and Electron Cryomicroscopy", Molecular cell, vol. 25, no. 3, pp. 427-440. Cerca con Google

Paisan-Ruiz, C. 2004, "Cloning of the gene containing mutations that cause PARK8-linked Parkinson's disease", Neuron, vol. 44, no. 4, pp. 595-600. Cerca con Google

Pavan, K.A., Caraveo, G. & Lindquist, S. 2010, "α-Synuclein: Membrane Interactions and Toxicity in Parkinson’s Disease", Annu. Rev. Cell Dev. Biol., vol. 26, pp. 211-233. Cerca con Google

Recchia, A., Debetto, P., Negro, P., Guidolin, D., Skaper, S.D. & Giusti, P. 2004, "α-Synuclein and Parkinson’s disease ", The FASEB Journal, vol. 18, no. 6, pp. 617-626. Cerca con Google

Rosenquist, M., Sehnke, P., Ferl, R.J., Sommarin, M. & Larsson, C. 2000, "Evolution of the 14-3-3 protein family: Does the large number of isoforms in multicellular organisms reflect functional specificity?", Journal of Molecular Evolution, vol. 51, no. 5, pp. 446-458. Cerca con Google

Rudenko, I.N. & Cookson, M.R. 2010, "14-3-3 proteins are promising LRRK2 interactors", The Biochemical journal, vol. 430, no. 3, pp. e5-6. Cerca con Google

Sato, S., Chiba, T., Sakata, E., Kato, K., Mizuno, Y., Hattori, N. & Tanaka, K. 2006, "14-3-3eta is a Novel Regulator of Parkin Ubiquitin Ligase", The EMBO journal, vol. 25, no. 1, pp. 211-221. Cerca con Google

Satoh, J., Onoue, H. & Arima, K.Y.,T. 2005, "The 14-3-3 protein forms a molecular complex with heat shock protein Hsp60 and cellular prion protein.", J Neuropathol Exp Neurol, vol. 64, no. 10, pp. 858-868. Cerca con Google

Shin, N. 2008, "LRRK2 regulates synaptic vesicle endocytosis", Experimental cell research, vol. 314, no. 10, pp. 2055-2065. Cerca con Google

Spillantini, M.G., Crowther, R.A., Jakes, R., Hasegawa, M. & Goedert, M. 1998, "α-Synuclein in filamentous inclusions of Lewy bodies from Parkinson’s disease and dementia with Lewy bodies", Proceedings of the National Academy of Sciences, vol. 95, no. 11, pp. 6469-6473. Cerca con Google

Steinacker, P., Aitken, A. & Otto, M. 2011, "14-3-3 proteins in neurodegeneration", Seminars in Cell and Developmental Biology, vol. 22, no. 7, pp. 696-704. Cerca con Google

Wang, J., Lou, H., Pedersen, C.J., Smith, A.D. & Perez, R.G. 2009, "14-3-3 Contributes to Tyrosine Hydroxylase Activity in MN9D Cells", Journal of Biological Chemistry, vol. 284, no. 21, pp. 14011-14019. Cerca con Google

Wu, M. 2006, "SWTY - A general peptide probe for homogeneous solution binding assay of 14-3-3 proteins", Analytical Biochemistry, vol. 349, no. 2, pp. 186-196. Cerca con Google

Xu, J. 2002, "Dopamine-dependent neurotoxicity of alpha-synuclein: A mechanism for selective neurodegeneration in Parkinson disease", Nature medicine, vol. 8, no. 6, pp. 600-606. Cerca con Google

Yacoubian, T.A., Slone, S.R., Harrington, A.J., Hamamichi, S., Schieltz, J.M., Caldwell, K.A., Caldwell, G.A. & Standaert, D.G. 2010, "Differential neuroprotective effects of 14-3-3 proteins in models of Parkinson's disease", Cell death & disease, vol. 1, pp. e2. Cerca con Google

Yagi, H., Kusaka, E., Hongo, K., Mizobata, T. & Kawata, Y. 2005, "Amyloid Fibril Formation of α-Synuclein Is Accelerated by Preformed Amyloid Seeds of Other Proteins", Journal of Biological Chemistry, vol. 280, no. 46, pp. 38609-38616. Cerca con Google

Yano, M., Nakamuta, S., Wu, X., Okumura, Y. & Kido, H. 2006, "A Novel Function of 14-3-3 Protein: 14-3-3δ Is a Heat-Shock–related Molecular Chaperone That Dissolves Thermal-aggregated Proteins", Mol Biol Cell, vol. 17, no. 11, pp. 4769-4779. Cerca con Google

Zannis Hadjopoulos, M. 2008, "14-3-3 cruciform-binding proteins as regulators of eukaryotic DNA replication", Trends in biochemical sciences, vol. 33, no. 1, pp. 44-50. Cerca con Google

Zhao, J. 2011, "14-3-3 proteins as potential therapeutic targets", Seminars in cell & developmental biology, vol. 22, no. 7, pp. 705-712. Cerca con Google

Zhu, M., Souillac, P.O., Ionescu-Zanetti, C., Carter, S.A. & Fink, A.L. 2002, "Surface-catalyzed amyloid fibril formation", The Journal of biological chemistry, vol. 277, no. 52, pp. 50914-50922. Cerca con Google

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